产品介绍
Sinoday™gelred 是一种高灵敏、无毒超安全和超稳定的荧光核酸凝胶染色试剂(在工作浓度中)。它可替代溴化乙锭 (EtBr,EB),具有远高于 EB 的灵敏度,同时不需要脱色。由于 Sinoday™gelred 和 EB 有相同的光谱特性,因此用它替代 EB 时不需要更换成像系统。
使用方法
1.胶染法(用法同 EB)
(1)制胶时加入 Sinoday™gelred 核酸染料(例如:每 50 mL 琼脂糖溶液中加入 5 μL Sinoday™gelred10,000×储液,以此比例类推)。(2)按照常规方法进行电泳。
注意事项:
此方法染色染料用量相对较少,500 μL 染料大约可以做100 块 50 mL 的胶。由于 Sinoday™gelred 具有良好的热稳定性,可以在热的琼脂糖溶液中直接添加,而不需要等待溶液冷却。摇晃,振荡或者翻转以保证染料充分混匀。也可以选择将 Sinoday™gelred 储液加到含有琼脂糖粉末的电泳缓冲液中,然后用微波炉或其他常用方式加热以制备琼脂糖凝胶。 Sinoday™gelred 兼容所有常用的电泳缓冲溶液。
2.泡染法
(1)按照常规方法进行电泳。
(2)用 H2O 将 Sinoday™gelred 10,000× 储液稀释约 3,300 倍到 0.1 M NaCl 中,制成 3× 染色液。(例如将 15 μL Sinoday™gelred 10,000× 储液,5 mL 1 M NaCl 加到 45 mL H2O 中)。
(3)将凝胶小心地放入合适的容器中,如聚丙烯容器中,缓慢加入足量的 3× 染色液浸没凝胶,室温振荡染色 30 min左右,即可获得理想的效果。最佳染色时间根据凝胶厚度以及琼脂糖浓度不同而略有不同。对于含 3.5~10%丙烯酰胺的凝胶,染色时间通常介于 30 min 到 1 h,并随丙烯酰胺含量增加而延长。
强烈推荐:为了缩短泡染时间,染色液可以预先加热至 70℃左右,然后放入凝胶,孵育 10min 即可获得理想的效果。具体步骤见下页使用说明。
注意事项:
用泡染法染色时,染料用量较多,单次使用的染色液可重复使用 3 次左右。3×Sinoday™gelred 染色液可以大量制备,在室温下避光保存直至用完。注:1. 如果总是看到条带弥散或分离不理想,建议使用泡染法染色以确认问题是否与染料有关。2. 如果染色后问题依旧存在,则说明问题与染料无关,请尝试:降低琼脂糖浓度、选用更长的凝胶、延长凝胶时间以保证边缘清晰、改进上样技巧或选择泡染法色。
具体详见说明书 下载链接 GelRed 核酸凝胶染料