【产品货号】货号：202010 规格：50次

【产品简介】                                                         说明书下载链接：大 圣 支 原 体PCR检 测 试 剂 盒

PCR Mycoplasma Test Kit 可用于各种生物材料(如细胞培养物、实验动物分泌物、动物血清等) 支原体感染的检测。应用聚合酶链式反应技术（PCR）对支原体 16s-rRNA基因保守区域的特异性片段进行扩增检测。该方法可以在数小时内得到结果,与传统的选择性培养基培养检测方法相比较，本方法更快速，灵敏度和特异性更高，不会出现由于培养法检测时大量培养支原体而可能带来的次级污染的问题。国内外研究表明，细胞培养的支原体污染中，有 98％以上是由以下五种支原体引起的：M.orale、M.arginini、M.hyorhinis和A.laidlawii，M.Fermentans。本试剂盒能检测包括以上五种常见支原体在内的40多种支原体。

【试剂盒组成】

（1）2 × PCR Mix; （2）阳性对照 ；（3）使用说明书

【原 理】

PCR检测试剂盒中2 × PCR Mix含有 PCR反应所需要各种试剂组分，如：引物、dNTPs、缓冲液、Taq酶、稳定剂等。只需将2 × PCR Mix用无菌去离子水2倍稀释后加入1 μl检测样品，即可进行PCR扩增反应。PCR扩增产物经琼脂糖电泳染色判断，阳性样本将在270 bp处出现特异性条带。

【使用方法】

实验所需器材与试剂

1.1 器材

（1）PCR仪；（2）台式离心机；（3）干式恒温器；（4）水平电泳槽；（5）稳压稳流电源；（6）凝胶成像仪。

1.2 试剂

（1）琼脂糖；（2）EB（溴化乙锭）；（3）灭菌去离子水或双蒸水。

【实验步骤】

1.支原体检测样品预处理:

（1）待检测的细胞应在不含抗生素的培养液中培养2-3天。

（2）将1 ml待检测样品（细胞培养上清）、阳性对照（确定支原体污染的细胞培养上清）、阴性对照1（无菌水）、阴性对照2（确定无支原体污染的细胞培养上清）吸入1.5 ml离心管中，13000 rpm离心10 min，弃上清。

（3）在上步的沉淀中加入200ul灭菌去离子水或双蒸水，煮沸10 min。

（4）13000rpm离心10min，取上清作为PCR的反应模板。