MW40000线性PEI转染试剂 Polyethylenimine Linear(PEI)
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MW40000线性PEI转染试剂 Polyethylenimine Linear(PEI)

货      号 SB-C0340
规      格 100mg
品      牌 圣尔生物share-bio
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MW40000线性PEI转染试剂 Polyethylenimine Linear(PEI) 介绍

产品详情

【产品概述

PEI 40000是一种分子量为40000的高电荷阳离子聚合物,容易结合带负电荷的核酸分子,形成复合物,并使该复合物进入细胞中。PEI 40000是一种瞬时转染试剂,细胞毒性低,转染效率高,在HEK293和CHO等细胞中基因表达效率较高。目前已经验证线性PEI转染试剂广泛适用于多种细胞系包括HEK-293、HEK293T、CHO-K1、COS-1、COS-7、NIH/3T3、Sf9、HepG2和Hela细胞等,转染效率高达80%~90%。

PEI 40000较易溶解,可直接在水中溶解操作简便,更易于使用,且比PEI 25000的转染效果好;PEI 25000含有4-11%的丙酰基残留,其能阻止聚合物主链与DNA结合。相较于PEI 25000,PEI 40000是完全脱落的结构,因此其性能始终高效如一。

溶解性

溶于水,不溶于有机溶剂:苯,乙醚和丙酮

储液配置

1 材料

PEI 40000、超纯水、1 mol/L氢氧化钠(NaOH)、一次性0.1~0.2 μm PES真空无菌过滤器、无菌HDPE或聚丙烯储存瓶

2 配置储存液(1 mg/mL)

2.1 1 L玻璃烧杯,将1 g PEI 40000粉末加入900 mL 超纯水中,在磁子搅拌器上搅拌均匀。

2.2 PEI 40000完全溶解(通常不到5 mins),用氢氧化钠(1 mol/L)溶液调节pH为6.8-6.9。

2.3 将溶液转入量筒内,并加水定容到1L。

2.4 用一次性0.1~0.2 µm PES真空过滤器过滤除菌,即得到1 mg/mL的储存液,按需分装并储存在4°C,3个月稳定。

转染操作流程

1.贴壁细胞转染操作流程(以6孔板为例)

1)接种细胞:为了提高转染效率,建议在转染前一天接种细胞,以转染时细胞密度在70%~80%为宜。

2)准备DNA-PEI复合物:按照以下体系配制DNA-PEI核酸-转染试剂复合物:

对于每孔细胞,使用100 μL无血清培养基稀释2 μg目的DNA,充分混匀成DNA稀释液。

立刻向100 μL的DNA稀释液中加入4 μL的PEI 40000转染试剂,轻轻混匀。

在室温下孵育10~15 min,使得形成DNA-PEI阳离子核酸转染试剂复合物。

3)转染细胞:

在形成复合物过程中,移除细胞生长培养基,每孔中加入2 mL新鲜预热的完全培养基。

直接将100 μL DNA-PEI核酸-PEI复合物加入细胞中,摇动培养板,轻轻混匀。

37 ℃,5% CO2培养箱培养,转染后最快5 h即可检测到转入基因的表达。请自行确定适合检测时间。

参考用量

培养皿

表面积(cm2)

DNA的量(μg)

转染试剂的量(μL)

稀释液体积(μL)

培养基总量

96孔板

0.3

0.1

0.1

10

100μL

48孔板

0.7

0.2

0.3

20

200μL

24孔板

1.9

0.5

1

50

500μL

12孔板

3.8

1

2

50

1mL

6孔板

10

2

4

100

2 mL

25cm2培养瓶

21

4

8

200

4 mL

75cm2培养瓶

58

10

20

500

10 mL

 

储存条件: 室温密封保存,有效期2年。储存液在4℃保存,有效期3个月。
搜索质检报告(COA)
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MW40000线性PEI转染试剂 Polyethylenimine Linear(PEI) 说明书

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