| 产品编号 | 名称 | 包装 | 品牌 | 目录价 | 促销价 | 货期 | 数量 | 购物车 |
| SB-EGR118S | T4 DNA聚合酶（T4 DNA polymerase） | 1000U | 圣尔生物share-bio | ¥500.00 |
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| SB-EGR118S | T4 DNA聚合酶（T4 DNA polymerase） | 200U | 圣尔生物share-bio | ¥140.00 |
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T4 DNA聚合酶（T4 DNA polymerase） 介绍
| 产品详情 | 【产品说明】 T4 DNA polymerase是来自于T4噬菌体的DNA聚合酶，分子量为104kDa，可以催化5´→3’方向的脱氧核糖核酸合成，需要模板和引物的存在。该酶具有3´→5´核酸外切酶活性，且活性比E.coli DNA polymerase I的Klenow fragment高100-1000倍。该酶不具有5´→3’核酸外切酶活性。 本公司T4 DNA polymerase 是重组表达，并经多步纯化制备的重组蛋白。 【单位定义】 1单位指在温度为37℃，30min内将10nmol dNTP掺入酸不溶性物质所需的酶量。 【活性测定条件】 1× T4 DNA Polymerase Buffer：33 mM Tris-acetate pH7.9， 66 mM KAc ，10 mM Mg(Ac)2，0.5 mM DTT，0.1mg/ml BSA。 【浓度】 5U/μl 【保存条件】 -20℃可保存2年，避免反复冻融。 【特点】 Ø 无链置换活性 Ø 无5’-3’外切酶活性，不能进行切口平移 Ø 合成错误率~ 1×10-6 bases Ø 热失活：75°C for 20 min 【应用】 Ø 缝隙填充(无缺口平移活性) Ø 去除3’突出单链或补平5’突出单链，形成平末端 Ø 生成无缝克隆中的5’突出端，实现基因和载体的互补配对 【酶保存液】 20 mM Tris-HCl，200 mM NaCl，10 mM MgCl2，5mM DTT，50% Glycerol，pH 7.5。 【注意事项】 l 由于该酶具有很强的3´→5´ 核酸外切酶活性，提高反应温度、增加酶量、没有加入 dNTP或反应时间过长都可能造成 DNA 末端碱基被切除形成3’端凹陷。 l 适用于凹陷单链区聚合补平反应（聚合酶反应）的缓冲液包括：AM Buffer A-D、A1-D1、T4 DNA连接酶反应缓冲液。 l 适用于突出单链区水解削平反应（3’外切酶反应）的缓冲液包括：AM Buffer A、B、D、A1、B1、D1、T4 DNA连接酶反应缓冲液；不建议使用AM Buffer C和C1。 l 鉴于AM Buffer B2是此酶最优Buffer，当使用不包含BSA的缓冲液时，建议补充BSA。 l Activity in AM Buffers：AM Buffer A: 60% ；AM Buffer B、C、D: 100%。 l 离子强度超过100 mM时活性将被抑制，SH基的还原剂促进活性。 l 活性易受模板DNA高级结构的影响，T4 gene 32（T4 SSB）蛋白可以显著提高聚合酶活性，完全抑制3′→5′外切核酸酶活性。 【应用实例】 去除3’突出单链或补平5’突出单链，形成平末端 1）按下表配制反应体系
2）37℃ 30min反应， 3）75℃ 15min失活酶， 按需进行后续实验。 |
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| 储存条件: | -20℃可保存2年，避免反复冻融。 |
