RAMOS人B淋巴细胞瘤细胞
RAMOS人B淋巴细胞瘤细胞
货      号 SB-YMHX198
规      格 T25
品      牌 圣尔生物share-bio
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SB-YMHX198 RAMOS人B淋巴细胞瘤细胞 T25 圣尔生物share-bio ¥1200.00
产品详情 细胞介绍 该细胞来源于一位3岁的白人Burkitt淋巴瘤患者;EBV阴性;表达IL-4受体和低亲和性IgE受体(CD23);分泌IgM(lamda L);表达膜型和分泌型的免疫球蛋白。   细胞特性 1) 来源:血液 2) 形态:淋巴母细胞样,悬浮生长 3) 含量:>1x106 个/mL 4) 污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性 5) 规格:T25瓶或者1mL冻存管包装   运输和保存 可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式: (1)干冰运输,收到后立即转入液氮或者-80度冰箱冻存或直接复苏; (2)存活细胞,收到后应继续生长,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。 (3) 收到细胞后请拍照,3天内如果发现污染,请及时拍照与我们联系。   细胞用途: 仅供科研使用。   细胞接收后的处理: 1) 收到细胞后,请检查是否漏液,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长状态,酒精消毒瓶壁并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 将T25瓶中的细胞培养基离心后,去上清,添加6ml完全培养基,加入新的T25瓶中继续培养。 4) 如果细胞长满80%请及时进行细胞传代. 5)  接到细胞次日,请检查细胞是否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。                         细胞培养步骤 一.培养基及培养冻存条件准备: 1) 准备RPMI-1640培养基;优质胎牛血清(热灭活),10%;双抗,1%。 2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。 3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。 二. 细胞处理: 1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,离心管加入4mL培养基混合均匀。在800-1000RPM条件下离心4-5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入T25培养瓶中培养,补加培养基至6ml。 2) 细胞传代:如果细胞密度达80%,即可进行传代培养。 注:第一次传代推荐传代比例为1:2,以后传代比例可根据客户需要自己决定。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。 下面T25瓶为类; 1,细胞冻存时,取上清,可使用血球计数板计数。 2,4min ,1000rpm 离心去掉上清。加1ml血清重悬细胞,根据细胞数量加入血清和DMSO,轻轻混匀,DMSO终浓度为10%,细胞密度1-2xE6/ml,每支冻存管冻存1ml细胞悬液,注意冻存管做好标识。 3,将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
储存条件: 1) 1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。 2) T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过92%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
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