BRL大鼠肝细胞（暂不提供）
| 货 号 | SB-YMRX003 | ||
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| 规 格 | T25 | ||
| 品 牌 | 圣尔生物share-bio | ||
| 产品编号 | 名称 | 包装 | 品牌 | 目录价 | 促销价 | 货期 | 数量 | 购物车 |
| SB-YMRX003 | BRL大鼠肝细胞（暂不提供） | T25 | 圣尔生物share-bio | ¥1200.00 |
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| 产品详情 | 细胞特性 1） 来源： 大鼠肝 2） 形态 ： 上皮细胞 样 3） 含量： >1x10 6 个/mL 4） 污染： 支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性 5） 规格： T75瓶 或者 1mL冻存管包装 运输和保存： 使用 含有 优质胎牛血清的2ml冻存管 发送 存活 细胞 。收到细胞 后， 可 在 1000RPM， 常温 条件 下 ， 离心 5min后 ， 于 洁净操作台弃去上清，加入推荐使用的培养基 后 转移至 250px培养皿 或者 T75培养瓶 中培养 ， 传代 达到 细胞生长状态良好时，再 进行 冻存。 具体 操作见 细胞 培养步骤。 细胞用途： 仅供科研使用。 细胞培养步骤 一． 培养基 及 培养 冻存 条件准备： 1） 准备 DMEM-H 培 养基(DMEM -H ，GIBCO，货号12800017，添加NaHCO 3 1.5g/L)，90%；胎牛血清，10%。 2） 培养条件 ： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度 ， 培养箱湿度为 70 %-80%。 3） 冻存液 ： 90 %完全培养基， 10 %DMSO ， 现用 现 配 。 液氮储存。 二． 细胞 处理 ： 1） 复苏细胞： 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或 将细胞悬液加入 250px皿中 ， 加入 约 8 ml 培养基， 培养过夜） 。第二天换液并检查细胞密度。 2） 细胞传代： 如果 细胞 密度达8 0%-90% ， 即 可进行 传代培养 。 对于 贴壁 细胞， 传代可参考以下方法： 1. 弃去 培养上清，用不含钙 、镁离子 的 PBS润洗细胞1 -2 次 。 2. 加2ml消化液 （ 0.25 %Trypsin-0.53mM EDTA） 于 培养瓶中，置于 37℃ 培养箱 中消化1 - 2分钟 ，然后在显微镜下观察 细胞消化 情况， 若 细胞大部分变圆 并脱落 ，迅速拿回操作台，轻敲 几下 培养瓶后加少量培养基终止 消化 。 3. 按6 -8ml/ 瓶补加 培养基，轻轻打匀后吸出 ，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例 分到新的 含8 ml 培养基 的新皿中或者瓶中 。 3）细胞 冻存： 待 细胞生长状态良好时， 可 进行 细胞 冻存 。贴壁 细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶， 细胞 变圆脱落后，加入约 1 ml 含 血清的培养基后 加入 冻存管中，再添加 10 %DMSO 后 进行冻存 。 |
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| 储存条件: | 1) 1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。 2) T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。 |
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