GelRed 核酸凝胶染料(10,000×) 详情

GelRed 核酸凝胶染料(10,000×)

产品组成

保存条件

常温（10~25℃）避光保存24个月。

产品简介

GelRed是一种安全、灵敏、稳定的荧光核酸凝胶染色试剂，适用于琼脂糖或聚丙烯酰胺凝胶上的dsDNA、ssDNA和RNA染色，经过本产品染色的DNA条带在紫外光投射下呈现红色荧光，可以替代溴化乙锭（EtBr） 。艾姆斯氏试验结果也表明，该染料的诱变性远远小于溴化乙锭（EtBr），使用更加安全。

GelRed和EB具有相同的光谱特性，不需要更换成像系统，使用与观察EB相同的普通紫外凝胶透射仪观察即可，在300 nm紫外光附近可得到最佳激发。注意GelRed不能被488 nm氩离子激光器（如蓝光透射仪）或相似波长的可见光完全激发，因此不推荐使用此类激发装置的成像系统。

产品特点

² 安全无毒：GelRed独特的油性和大分子量特点使其不能穿透细胞膜进入细胞内； 

² 灵敏度高：适用于各种分子量DNA电泳，对于微量的DNA具有更高的检测灵敏度；

² 信噪比高：样品荧光信号强，背景信号低；

² 适用范围广：胶染法（电泳前染色）和泡染法（电泳后染色）均可；适用于琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶电泳；可用于dsDNA、ssDNA和RNA染色。

适用范围

适用于琼脂糖或聚丙烯酰胺凝胶上的dsDNA、ssDNA和RNA染色。

注意事项

1. 染料无需低温冷藏，请于室温下避光储存，避免沉淀。若出现沉淀，请将染料置于45~50℃

2 min，振荡使充分溶解后再使用；

2. 由于GelRed的高灵敏性， 建议减少DNA样品上样量，推荐已知浓度样品的上样量为50~200 ng/泳道；

3. 聚丙烯酰胺凝胶电泳请使用泡染法。

使用方法

一、胶染法（电泳前染色，用法同EB）

1. 配制合适浓度的琼脂糖凝胶；

2. 用微波炉加热使琼脂糖完全融化；

3. 加入GelRed使其终浓度为1× （即100 mL凝胶中加入10 μL GelRed 10,000×水溶液），此时溶液呈淡粉色；

4. 将含有1×GelRed染液的琼脂糖溶液倒入胶槽中，插入齿梳，室温凝固；

5. 按照常规方法进行电泳；

6. 用302 nm激发的UV凝胶成像系统观察结果。

二．泡染法 （电泳后染色）

1. 按照常规方法进行电泳；

2. 使用0.1 M NaCl溶液稀释GelRed染液至3×染色液（例如将15 μL GS-GelRed 10,000×水溶液加入50 mL 0.1 M NaCl溶液中）；

3. 将凝胶小心地放入合适的容器中，缓慢加入足量的3×染色液浸没凝胶，室温摇床孵育30 min（对于含3.5~10%丙烯酰胺的聚丙烯酰胺凝胶，需孵育30 min~1 h，时间随着丙烯酰胺含量增加而延长。单次使用的3×染色液可重复使用3次左右，室温避光保存）；

4. 用302 nm激发的UV凝胶成像系统观察结果。

常见问题与解决办法

Q1：使用胶染法，出现DNA条带弥散、拖尾或弯曲等现象？

A1：

1) 确保使用的染料终浓度为1×；

2) DNA上样量过多。将DNA样品上样量减少至1/3或1/5；

3) 凝胶浓度不合适。检测大片段DNA建议使用低浓度琼脂糖凝胶；

4) 样品中loading buffer过量。loading buffer中的SDS可能会影响电泳效果，建议减少loading buffer用量；

5) 使用合适的电压，建议5~10 V/cm；

6) 使用新鲜的电泳缓冲液。